怎样排除暗场显微镜的故障

2021-09-16 10:03:51 admin 4

是使用的东西就会有故障,任何东西物品都不是完美的,那么暗场显微镜也不能例外。那么暗场显微镜如果出现故障,我们怎样排除或者怎样预防呢?下面我们来例举在暗场显微镜使用中出现的故障概率比较多的问题来一一解决。我们一起共勉,也有任何疑问敬请致电021-51602084.

问题:
照明不足以使标本可见,或标本可见但非常微弱。
解决方法光源强度太低。将强度提高到最大或更换光源,如果可能的话,用更大的强度之一。如果这不能解决问题,请检查台下冷凝器以确保它使用合适尺寸的场挡块正确定位。此外,检查彩色和/或中性密度滤光片、偏振片、延迟板或任何其他可能降低照明强度的组件的光路。
如果此问题出现在高数值孔径反射聚光镜上,请检查以确保聚光镜顶部透镜正确涂油到显微镜载玻片的底部。如果浸入式触点已损坏,请重新涂抹油并将聚光镜架起来,直到顶部镜头完全浸入油中并与载玻片底部接触。

问题:
视野中心有一个暗点,降低了照明强度,但周边的物体照明良好,看起来很正常。
解决方案台下聚光镜位置不正确或光阑尺寸不适合物镜。在视场中观察样品时,小心地上下放置聚光镜。检查以确保聚光镜孔径和视场光阑都设置在全开位置。如果这不影响照明,请更改视场光阑尺寸,使其稍大或稍小,然后重新检查照明。当使用过厚(大于标准一毫米)的显微镜载玻片时,有时会出现这个问题。使用千分尺或一组卡尺来确定载玻片和载玻片/盖玻片组合的厚度。如果幻灯片太厚,

问题:
灯泡的使用寿命往往很短,灯泡内部烧结有黑色蒸发钨涂层。
解决方法灯泡长期在过电压下使用,肯定会缩短寿命。在对样品进行观察和/或显微照相后,更换灯泡并降低灯电压。

问题:
图像有一个明场外围,在中心有或没有暗区。
解决方案当台下聚光器居中不正确或场光阑太小时,这个问题很典型。恢复到明场并重新建立科勒照明条件,然后重复暗场程序,确保聚光镜居中。如果这没有帮助,请增加视场光阑的大小,直到建立适当的暗场条件。当使用暗场聚光镜的数值孔径太高的物镜时,也可能出现这个问题。如果物镜中有内部虹膜光阑,则减小虹膜开口尺寸以确定是否有过多的倾斜照明进入物镜的前透镜。此外,它可能有助于增加视场光阑的大小或更改为更高数值孔径的反射暗场聚光镜。

问题:
视野外围只有一侧明亮。
解决方案检查物镜转盘,确保物镜正确定位在显微镜的光轴上。当物镜正确定位时,有一个止动装置应该会产生积极的“咔哒声”。如果视场光阑未正确居中,也可能会出现此问题。取下目镜并在目镜筒中放置一个相位望远镜(或使用 Bertrand 透镜),然后使用定心螺钉正确对齐视场光阑。

问题:
标本的图像不清晰,缺乏足够的对比度和细节。
解决方案:样品可能不适合暗场显微镜检查。许多染色的标本不会散射足够的光,无法在暗场条件下清晰成像。标本厚度也可能是一个问题,因为非常薄的标本通常不能用暗场聚光镜发出的斜光线很好地成像。更改为明场、相位对比度、DIC 或霍夫曼调制对比度,以确定这是否可以提高样本对比度。

问题:
失焦的明亮区域会阻碍暗场标本的观察和/或显微摄影。
解决方案这可能是由于聚光器上方某处光学表面的灰尘、头发、纤维和/或污垢污染所致。用光学级纸巾或棉花彻底清洁样品载玻片。有时,由于物镜前透镜上的污染,会出现此问题。小心地从物镜转盘座上松开物镜,并在通过目镜观察样品的同时缓慢转动。如果障碍物随物镜旋转,则可能是由于前镜头上的灰尘造成的。取下物镜并轻轻呼气弄湿前透镜,然后用镜头纸或包裹在长木棒上的棉签清洁。更换物镜并检查以确保障碍物已完全清除。

问题:
背景被均匀照亮,但不是完全黑暗或呈灰色。
解决方案当不透明视场光阑对于物镜来说太小时,通常会出现此问题。取下目镜并使用相位望远镜或 Bertrand 透镜观察物镜的后焦平面,光路中没有样品。整个后焦平面应该是暗的,周围没有任何亮光边缘。如果在物镜的后焦平面上观察到光弧或光圈,请更改为稍大的视场光阑。此外,减小视场光阑的尺寸将有助于抑制眩光并产生漆黑的背景(注意不要过多地关闭此虹膜孔径光阑)。

问题:
灯聚光镜的图像部分填满了视野,模糊了样品的细节。
解决方法载玻片可能太薄或聚光镜可能调得太高。测量显微镜载玻片的厚度并检查以确保油接触没有损坏。如果在保持载玻片底部上油时遇到困难,请尝试使用更厚的载玻片。

问题:
背景中出现颜色,或者背景光线不均匀并带有灰色阴影。
解决方案此问题通常发生在非常厚的整个安装件或安装介质中捕获了太多光散射污染伪影时。关闭视场光阑并旋转载玻片以找到最佳方向,然后确定问题是否已得到纠正。样品可能需要重新安装在更薄的安装座上,或者安装介质可能需要过滤。用柔软的镜头纸或棉签仔细清洁整个显微镜载玻片和盖玻片。

问题:
在水样中观察水生生物时,标本不断地向一个方向漂移,这使得观察和图像捕捉变得困难。
解决方案由于盖玻片边缘的缓慢蒸发,正在产生对流。在盖玻片的外围放置一粒凡士林或 Cytoseal 封固剂,将其牢固地密封在显微镜载玻片上。可以将商业产品添加到水中以减缓这些微小生物的运动,使它们更容易被捕获。

问题:
通过 10 倍物镜观察样品时,视野中心有一个长方形光点。
解决方案灯泡聚光镜可能未正确聚焦或漫射过滤器可能丢失,导致视野中出现灯泡灯丝图像。重新聚焦聚光镜并确保光路中有扩散滤光片。

问题:
视场有亮点,并且在实现标本的清晰聚焦方面存在问题。
解决方案小气泡可能会被困在聚光镜顶部和显微镜载玻片底部之间的油中。取下目镜(或插入 Bertrand 透镜)以观察物镜的后焦平面,在那里可以看到气泡。要进行补救,请断开油接触并用棉签去除任何残留的气泡。清除聚光镜前透镜和显微镜载玻片上多余的油,然后在透镜上滴一滴干净的油。如果问题仍然存在,请在重新涂抹油之前彻底清洁所有光学表面。

问题:
在高倍率下,胶体粒子显示出不完整的牛顿环,并且看起来照明不均匀。
解决方案冷凝器可能偏离中心。更改为较低功率的目标并将聚光镜重新居中。仔细检查以确定更高功率的物镜是否具有不同的中心,如果是,则将物镜居中于显微镜光轴。

以上问题的解决方案希望能解决显微镜出现的问题和故障,也希望大家遇到新问题能够一起沟通和解决呢。